高分泌発現微生物ゲノムへの長鎖DNA高効率部位特異的導入法の開発

研究課題

研究責任者	平野展孝日本大学, 工学部, 助教
研究期間 (年度)	2011
概要	本研究開発では、ファージ由来部位特異的遺伝子組み換え酵素を用いて、高分泌発現細菌ゲノムを対象に、長鎖DNAの高効率な部位特異的導入法の開発を目標とした。しかし、本酵素によって効率的にゲノム上へ長鎖DNAを導入出来る株の作出には至らなかった。これまでの遺伝子導入試験から、本酵素の組み換え効率は、挿入標的部位のゲノム上の位置に大きく左右されることが示唆されている。そこで、標的部位の位置と組み換え効率の相関を解明するため、大腸菌ゲノムを対象に詳細な検討を行った。その結果、複製起点近傍に標的部位が挿入された場合にのみ高い組み換え効率が得られることが明らかとなった。今後は、高分泌発現細菌の複製起点近傍へ標的部位を挿入することにより、遺伝子導入法の開発を行ってゆく予定である。